• notifications1
  • menü

Bugün : 18 Eylül 2021 Cumartesi

Lowry Metodu (Folin Fenol Metodu) ile Protein Tayini

 

Yöntemin Prensibi

Alkali ortamda bakır iyonu (Cu+2 ) proteinlerdeki peptid bağları ile bir kompleks oluşturur ve Cu+1 e indirgenir. İndirgenmiş bakır ve proteinlerin yan zincirinde yer alan Tyr, Trp ve Cys aminoasitleri Folin-Fenol reaktifini indirgeyerek renk oluşumuna neden olur olur. Oluşan rengin şiddeti protein konsantrasyonu ile doğru orantılıdır ve 660 nm’de spektrofotometrik olarak ölçülür.

 

Kullanılan Malzemeler ve Cihazlar

  • Spektrofotometre
  • Spektrofotometre küveti 
  • Terazi
  • Pipet (5 mL)
  • Mikropipet (100-1000 µl)
  • Pipet ucu (mavi)
  • Falcon tüpü (15 mL)
  • Vorteks
  • Balonjoje( 100 mL, 1000 mL)

 

Kullanılan Kimyasallar

  1. BSA (bovine serum albumin): Stok çözeltiden derişimi 0, 20, 40, 60, 80, 100 mg/L olan standart çözeltiler hazırlanır.
  2. Çözelti A: 1000 ml damıtık sudaki 20 g Na2CO3, 4 g NaOH ve 1.6 g Na-K tartarat çözeltisi
  3. Çözelti B:100 ml damıtık sudaki 4 g Cu2SO4.5H2O çözeltisi
  4. Çözelti C: 100:1 (v/v) oranında çözelti A : çözelti B karışımı
  5. Folin-Ciocalteu’s fenol çözeltisi 

 


Deneyin Yapılışı

Deney tüpüne analizi yapılacak örnekten 1 mL alınır. Üzerine 3 ml çözelti C eklenerek oda sıcaklığında 15 dakika bekletilir. Bu sürenin sonunda 0.3 ml Folin-fenol kimyasalı eklenip vortekslenir ve 45 dakika oda sıcaklığında inkübasyona bırakılır. UV spektrofotometrede çözeltilerin 660 nm’deki absorbans değerleri okunarak protein miktarları saptanır.

 

Standart eğrisi oluşturmak için tüplere örnek yerine konsantrasyonları belli olan standart çözeltiden (BSA)  1’er mL eklenerek yukarıdaki prosedür aynen uygulanır. 660 nm’de absorbans okutularak konsantrasyona karşı absorbans grafiği çizilir. Şahit çözelti için ise yine örnek yerine 1 mL saf su koyularak örnek için uygulanan prosedürün aynısı uygulanır.

x
Aklınıza bir soru mu takıldı ? Siz sorun uzmanlarımız cevap versin!

Güvenlik Kodu : 12522

(Güvenlik kodunu bu kutucuğa yazın!)

Nitrit Varlığının Belirlenmesi (nitel Olarak)

Nitrit Varlığının Belirlenmesi (nitel Olarak)

Nitrit Varlığının Belirlenmesi (Nitel olarak) Yöntemin Prensibi Kalitatif nitrit saptanmasında ilke ; bazik ortamda örnek bileşenlerindeki bulanıklık yapıcı maddeleri çöktürmek, kalan berrak süzüntüye sulandırılmış sülfürik asit v...

Et Ve Et Ürünlerinde Nişasta Tayini

Et Ve Et Ürünlerinde Nişasta Tayini

Et ve Et Ürünlerinde Nişasta Tayini Nişasta özellikle et ürünlerinde jöle maddelerinin dışarı taşmasını engellemektedir. Nişasta katılan et ürünleri daha kuru olmaktadır. Et ürünlerine dolgu maddesi olarak katılmasına rağmen yapısı gere...

Meyve Ve Sebze Mamüllerinde Nem Tayini

Meyve Ve Sebze Mamüllerinde Nem Tayini

Meyve ve Sebze Mamüllerinde Nem Tayini Yöntemin Prensibi Gıdalarda nem miktarı, genelde etüvde kurutma yöntemi ile yapılmaktadır. Belli bir sıcaklık altında örnekteki suyun uçurulması ve ağırlık kaybından nem miktarının bulunması i...

Mineral Yağ Aranması

Mineral Yağ Aranması

Mineral Yağ Aranması Yöntemin Prensibi Bu yöntem ile bitkisel yağlara mineral yağların katılıp katılmadığı tespit edilir. Kullanılan Malzemeler ve Cihazlar Deney tüpü Cam boncuk Cam Boru Büret ( 50 mL) Pipet ( 5 mL) Su Ban...

Gıdalarda Protein Tayini

Gıdalarda Protein Tayini

Kjeldahl Yöntemi 1883 yılında Johan Kjeldahl tarafından geliştirilmiş, bileşiklerin azot miktarını belirlemek için kullanılan oldukça eski bir yöntemdir. ™ Bu yöntemde bileşiklerde bulunan azot, derişik H2SO4’le ve Cu+2 iyonl...

Kurşun (Pb) Analizi

Kurşun (Pb) Analizi

Kurşun (Pb) Analizi Yöntemin Prensibi Gıda örneklerindeki organik kısım, kuru yakma yöntemi ile kül fırınında veya yaş yakma yönteminde asit yardımı ile tamamen yakılır. Geriye kalan inorganik kısında mineral aranması yapılır. K...

Çinko (Zn) Analizi

Çinko (Zn) Analizi

Çinko (Zn) Analizi Yöntemin Prensibi : Gıda örneklerindeki organik kısım, kuru yakma yöntemi ile kül fırınında veya yaş yakma yönteminde asit yardımı ile tamamen yakılır. Geriye kalan inorganik kısında mineral aranması yapılır. Kul...

KULLANICI GİRİŞİ

Kullanıcı Adınız

Şifreniz

Üye Ol Şifremi Unuttum

SİTE İSTATİSTİKLERİ
  • Konular (4.435)
  • Resimler (5.663)
  • Dokümanlar (1.876)
  • Üyeler (16.292)

WWW.SORHOCAM.COM

Başka yerde arama, tarıma dair aradığınız her ne varsa burada! Tarım Haberleri, bitki hastalıkları, zararlıları, gübreleme, ilaçlama ve daha fazlası...

Copright 2011 - 2021