• notifications1
  • menü

Bugün : 17 Mayıs 2021 Pazartesi

Lowry Metodu (Folin Fenol Metodu) ile Protein Tayini

 

Yöntemin Prensibi

Alkali ortamda bakır iyonu (Cu+2 ) proteinlerdeki peptid bağları ile bir kompleks oluşturur ve Cu+1 e indirgenir. İndirgenmiş bakır ve proteinlerin yan zincirinde yer alan Tyr, Trp ve Cys aminoasitleri Folin-Fenol reaktifini indirgeyerek renk oluşumuna neden olur olur. Oluşan rengin şiddeti protein konsantrasyonu ile doğru orantılıdır ve 660 nm’de spektrofotometrik olarak ölçülür.

 

Kullanılan Malzemeler ve Cihazlar

  • Spektrofotometre
  • Spektrofotometre küveti 
  • Terazi
  • Pipet (5 mL)
  • Mikropipet (100-1000 µl)
  • Pipet ucu (mavi)
  • Falcon tüpü (15 mL)
  • Vorteks
  • Balonjoje( 100 mL, 1000 mL)

 

Kullanılan Kimyasallar

  1. BSA (bovine serum albumin): Stok çözeltiden derişimi 0, 20, 40, 60, 80, 100 mg/L olan standart çözeltiler hazırlanır.
  2. Çözelti A: 1000 ml damıtık sudaki 20 g Na2CO3, 4 g NaOH ve 1.6 g Na-K tartarat çözeltisi
  3. Çözelti B:100 ml damıtık sudaki 4 g Cu2SO4.5H2O çözeltisi
  4. Çözelti C: 100:1 (v/v) oranında çözelti A : çözelti B karışımı
  5. Folin-Ciocalteu’s fenol çözeltisi 

 


Deneyin Yapılışı

Deney tüpüne analizi yapılacak örnekten 1 mL alınır. Üzerine 3 ml çözelti C eklenerek oda sıcaklığında 15 dakika bekletilir. Bu sürenin sonunda 0.3 ml Folin-fenol kimyasalı eklenip vortekslenir ve 45 dakika oda sıcaklığında inkübasyona bırakılır. UV spektrofotometrede çözeltilerin 660 nm’deki absorbans değerleri okunarak protein miktarları saptanır.

 

Standart eğrisi oluşturmak için tüplere örnek yerine konsantrasyonları belli olan standart çözeltiden (BSA)  1’er mL eklenerek yukarıdaki prosedür aynen uygulanır. 660 nm’de absorbans okutularak konsantrasyona karşı absorbans grafiği çizilir. Şahit çözelti için ise yine örnek yerine 1 mL saf su koyularak örnek için uygulanan prosedürün aynısı uygulanır.

x
Aklınıza bir soru mu takıldı ? Siz sorun uzmanlarımız cevap versin!

Güvenlik Kodu : 34066

(Güvenlik kodunu bu kutucuğa yazın!)

Diastaz Sayısı Tayini

Diastaz Sayısı Tayini

Diastaz sayısı tayini Bu tayinde kullanılacak bal numunesi, ön ısıtmaya tabi tutulmamalıdır. Yöntemin Prensibi Miktarı bilinen bal örneği, konsantrasyonu belli nişasta çözeltisi ile karıştırılarak sabit sıcaklıkta tutulur. Baldaki di...

Fosfor Analizi Volumetrik Yöntem

Fosfor Analizi Volumetrik Yöntem

Volumetrik yöntem Yöntemin Prensibi Yöntem kül haline getirilen numunenin, sitro molibdat çözeltisi ile muamele edilerek sodyum hidroksit çözeltisi ile titre edilmesi prensibine dayanır. Kullanılan Malzemeler Pipet (5,10 mL)...

Şeker Üretimi Proses Aşamaları

Şeker Üretimi Proses Aşamaları

Şeker Üretimi Proses Aşamaları Şeker üretimi proses aşamaları aşağıda görsel olarak verilmiştir.

Gazlı İçeceklerde Karbondioksit Tayini

Gazlı İçeceklerde Karbondioksit Tayini

Gazlı İçeceklerde Karbondioksit Tayini Yöntemin Prensibi Numuneye eklenen NaOH çözeltisinin bir kısmının CO2 ile bağlanarak Na2CO3 formuna dönüşmesi ve arta kalan NaOH miktarının tespiti ilkesine dayanır. Kullanılan Malzemeler ...

Wijs Metodu Ile İyot Sayısı

Wijs Metodu Ile İyot Sayısı

Wijs Metodu ile İyot Sayısı Yöntemin Prensibi Yağların ve yağ asitlerinin doymamışlık derecelerinin belirlenmesi ilkesine dayanır. İyot sayısı, ağırlık olarak yüz kısım yağın belli koşullar altında bağlayabildiği iyodun ağırlığını v...

Sütlü Ve Sütsüz Çikolata Kakao Yağı Tayini

Sütlü Ve Sütsüz Çikolata Kakao Yağı Tayini

Kakao Yağı Tayini Yöntemin Prensibi Sütsüz çikolata numunesinde, toplam yağ, kakao yağına eşittir. Sütlü çikolatalarda ise, kakao yağı miktarını analitik olarak doğrudan tayin etmek mümkün olmadığı için; toplam yağ bulunup bundan s...

Süt Tozunda Yabancı Madde Tayini

Süt Tozunda Yabancı Madde Tayini

Süt Tozunda Yabancı Madde Tayini Yöntemin Prensibi Süt tozuna dışarıdan bulaşmış olabilecek kirliliklerin tespiti ilkesine dayanır. Kullanılan Malzemeler Erlen (1L) Cam Baget Terazi Pastör pipeti Mikroskop Balonjoje (1 ...

KULLANICI GİRİŞİ

Kullanıcı Adınız

Şifreniz

Üye Ol Şifremi Unuttum

SİTE İSTATİSTİKLERİ
  • Konular (4.435)
  • Resimler (5.663)
  • Dokümanlar (1.875)
  • Üyeler (15.858)
WWW.SORHOCAM.COM

Başka yerde arama, tarıma dair aradığınız her ne varsa burada! Tarım Haberleri, bitki hastalıkları, zararlıları, gübreleme, ilaçlama ve daha fazlası...