• notifications1
  • menü

Bugün : 28 Eylül 2021 Salı

Besinsel Lif Analizi

Kullanılan Kimyasallar

 

Toplam Besinsel Lif Kiti (Merck 1.12979) :

α -amylase çözeltisi  5 mL
Protease çözeltisi 5 mL
Amyloglucosidase çözeltisi 3x15 mL

 

MES/TRİS tamponu: 19.52 g  2(N-morfolin)etan sülfonik asit (MES) (Merck1.06126) ve 14.2g tris(hidroksimetil)aminometan (TRİS) (Merck1.08382) 1.7 L deiyonize suda çözülür. Çözeltinin pH’ sı 6 N NaOH ile 8.2’ ye ayarlanır. Çözeltinin son hacmi 2 L ye saf su ile tamamlanır.

0.561 N HCl asit çözeltisi: 700 mL saf su üzerine 93.5 ml 6 N HCl asit koyularak 1Lt ye tamamlanır.

%95‘ lik etil alkol :95 mL mutlak (Merck 1.00983) etanol üzerine 5 mL saf su eklenir

%78‘ lik etil alkol : 78 mL mutlak (Merck 1.00983) etanol üzerine 5 mL saf su eklenir

Aseton (Merck 1.00014)

Petrol Eteri (Merck 1.01775)

 


Kullanılan Malzemeler

  • Falcon tüpü 50 mL
  • Gooch krozesi
  • Tüplük (50 mLFalcon tüpüne uygun)
  • Su Banyosu
  • Vakum pompası veya su trompu
  • Erlen(250 mL)
  • Nuche erleni
  • Etüv
  • Pipet (5,10 mL)
  • Mikropipet (0-200µl aralığında) 
  • Sarı pipet ucu
  • Vorteks
     

Deneyin yapılışı

Eğer örnek %5 ten fazla yağ içeriyor ise örnekteki yağ uzaklaştırılır. Örnek 3 defa 25 mL petrol eteri ile çalkalanıp süzülür. Daha sonra elde edilen yağsız örnek 70 C°’ da 2-3 saat kurutulur. Yağsız örnek  boyutu 0.3-0.5 mm mesh olacak şekilde öğütülür.


Enzimatik parçalanma:

50 mL falcon tüplerine1 g örnek tartılır. Üzerine 40 mL MES/TRIS çözeltisi eklenerek çözelti vortexlenir.

50 µl α -amylase çözeltisi eklenir, vortexlenir, 95-100C° ‘da 30 dakika bekletilir. Çözelti 60 C°’a soğutulur.

50 µl protease çözeltisi eklenir, vortexlenir, 60 C°’da -  30 dakika bekletilir.

5 mL 0.561 N HCL eklenerek çözeltinin pH 4.1-4.8 aralığına getirilir.

150 µl amyloglucosidase çözeltisi eklenir, vortexlenir, 60 C° -  30 dakika bekletilir. 


Toplam Besinsel Lif analizi yapılıcak ise;

Enzimatik parçalanma işlemi bittikten sonra örnek bir erlene 60 C° sıcaklıktaki 220 mL etanol  ile yıkanarak aktarılır.

Çözelti ağzı kapatılarak 1 saat bekletir.

Vakum yardımı ile daha önce sabit tartıma getirilmiş gooch krozesinden süzlür

Çökelek %78’lik etanol (3x15 mL) , %95’lik etanol (2x10 mL) ve  aseton (3x10 mL) ile yıkanır.

105 C°’da 1 gece etüvde bekletilir.

Tartım alınır (m2)

Parallerden birinde kül (k), diğerinde protein (p) analizi yapılır.

 

Çözünen ve Çözünmeyen  Besinsel Lif analizleri yapılacak ise;

Amyloglucosidase enzimi eklenip 30 dakika beklendikten sonra çözelti daha önceden sabit tartıma getirilen gooch krozesinden süzülür. Çökelek 70 C° sıcaklıktaki saf su ile (2x10mL) yıkanır. Çökelek ile çözünmeyen besinsel lif, çözelti ile ise çözünen besinsel lif analizi yapılır.

 


Çözünen Besinsel Lif analizi;

Süzüntünün ağırlığı 80 g olana kadar saf su eklenir

Önceden 60°C’ye ısıtılmış % 95 ‘ lik 320 ml etanol eklenir

Çökme işleminin tamamlanması için 1 saat bekletilir.

Çözelti sabit tartıma getirilmiş gooch krozesinden (cam kroze) süzülür.

Çökelek %78 ‘lik etanolle (3x15 ml), %95’ lik etanolle (2x10 ml ) ve son olarak asetonla (3x10 ml ) yıkanır.

105 C°’da 1 gece etüvde bekletilir.

Tartım alınır (m3)

Parallerden birinde kül (k), diğerinde protein (p) analizi yapılır.


Çözünmeyen Besinsel Lif analizi;
Çökelek % 95’lik etanol ile (2x10mL) ve aseton ile (2x10mL) yıkanır.

105 C°’da 1 gece etüvde bekletilir.

Tartım alınır (m4)

Parallerden birinde kül (k), diğerinde protein (p) analizi yapılır.


Hesaplamalar

Kül ve protein deney sonuçları bazen negatif sonuc verebilir. Negatif değerler hesaplamalara katılmamalıdır.

% Toplam diyet lif = [(m2 - m1) -( k+ p ) x100] /  m

% Çözünmeyen Diyet Lif = [(m4 - m1) - ( k+ p ) x100] / m

% Çözünen Diyet Lif = [(m3 - m1) - ( k+ p ) x100] /  m

m: alınan örnek miktarı

 

Not: Analiz, örnek miktarı ve buna bağlı olarak kimyasalların miktarları 4 'e bölünerek yapılabilinir (denenmiştir). Hangi firmanın enzimleri kullanılacak ise enzim aktiviteleri nedeniyle enzim miktarları firmanın belirttigi miktarlarda kullanılmalıdır.  Protein analizi, sonucun genellikle 0 çıkması nedeniyle yapılmamaktadır.

 

* Test kiti içerisinde yer alan orjinal kullanma kılavuzunu aşağıdaki bağlantıdan indirebilirisiniz.

x
Bu konu hakkındaki görüşlerinizi ve isteklerinizi bize iletebilirsiniz!

Güvenlik Kodu : 62598

(Güvenlik kodunu bu kutucuğa yazın!)

Metilen Mavisi İndirgenme Testi Analizi Nasıl Yapılır?

Metilen Mavisi İndirgenme Testi Analizi Nasıl Yapılır?

Metilen Mavisi İndirgenme Testi Yöntemin Prensibi Sütteki mikroorganizmaların hemen hemen hepsi sütün oksidasyon potansiyelini, içine katılan metilen mavisi, resazurin gibi boyaların rengini değiştirerek ölçüde etkileyebilmektedir. Te...

Nem Tayin Cihazı (İnfrared ısıtıcılı)

Nem Tayin Cihazı (İnfrared ısıtıcılı)

Nem Tayin Cihazı (İnfrared ısıtıcılı) Yapısında bir terazi ve ısıtıcı bulunduran cihaz, örneğin başlangıç ağırlığını ve kurutma süresince oluşan ağırlık kaybını hesaplayarak kısa sürede % nem veya kuru madde oranını hesaplar. C...

Gıdalarda Protein Tayini Analizi Nasıl Yapılır?

Gıdalarda Protein Tayini Analizi Nasıl Yapılır?

Kjeldahl Yöntemi 1883 yılında Johan Kjeldahl tarafından geliştirilmiş, bileşiklerin azot miktarını belirlemek için kullanılan oldukça eski bir yöntemdir. ™ Bu yöntemde bileşiklerde bulunan azot, derişik H2SO4’le ve Cu+2 iyonl...

Makarnanın Su Absorpsiyonu Analizi Nasıl Yapılır?

Makarnanın Su Absorpsiyonu Analizi Nasıl Yapılır?

Makarnanın Su Absorpsiyonu Yöntemin Prensibi Makarna kalitesini belirlemek amacı ile kullanılan gravimetrik bir yöntemdir Deneyin Yapılışı Makarnada suya geçen madde miktarı deneyinden elde edilen pişmiş makarnalar tartılır ...

Gıda Analizlerinde Asitlik Tayinleri Nasıl Yapılır?

Gıda Analizlerinde Asitlik Tayinleri Nasıl Yapılır?

Asitlik 100 g örnekte bulunan serbest asitleri nötrleştirmek için harcanan ayarlı baz (sodyum hidroksit veya potasyum hidroksit) çözeltisinin hacminin bulunmasıdır. Asitlik Cinsi Örneklerin titre edilebilen asitliği bazı asitler...

Besinsel Lif Analizi Nasıl Yapılır?

Besinsel Lif Analizi Nasıl Yapılır?

Besinsel Lif Analizi Kullanılan Kimyasallar Toplam Besinsel Lif Kiti (Merck 1.12979) : α -amylase çözeltisi 5 mL Protease çözeltisi 5 mL Amyloglucosidase çözeltisi 3x15 mL MES/TRİS tamponu: 19.52 g 2(N-morfolin)etan sü...

Peynirde Yağ Analizi Nasıl Yapılır?

Peynirde Yağ Analizi Nasıl Yapılır?

Peynirde Yağ Analizi Yöntemin prensibi Süt ve süt ürünlerinde yağ analizi yapılırken Gerber yöntemi kullanılır. Yöntem, protein ve zor çözünen tuzların derişik sülfürik asit ve amil alkol ile çözülüp, yağın parçalanması ilkesine da...

KULLANICI GİRİŞİ

Kullanıcı Adınız

Şifreniz

Üye Ol Şifremi Unuttum?

SORHOCAM.COM

Sorhocam.com tarım, gıda ve hayvancılık üzerine kurulmuş bir websitesidir. Websitemizde yetiştiricilik, hastalıklar, zararlılar vb. ile ilgili yazılar bulunmaktadır.

Yetiştiriciliği, aşılanması, budaması, hastalığı, zararı, zararlıları, zararlısı, mücadelesi, gübrelenmesi, ilaçlanması, faydası, faydaları, programı, önerileri, istekleri, tavsiyeleri, nedir, nelerdir, özellikleri, kullanım alanları, nasıl yapılır, nasıl olmalıdır